Микроскопическое исследование соскобов кожи: как делают?

Виды грибковых инфекций

Болезни грибкового генеза принято делить на пять групп, а именно:

1. Дерматомикозы — сюда относят микроспорию, трихофитию, эпидермофитию, рубромикоз и эпидермомикозы стоп. Они приводят к формированию процессов воспалительного характера в коже, не считаются исключением поражения ногтей и волос. Заразиться можно после контакта с больным человеком или животным. Основными проявлениями патологического процесса считаются появление очагов поражений, которые характеризуются отслоением чешуек на коже или ногтях. В связи с тем, что влажная среда наиболее приемлема для развития и размножения грибков, заражение чаще всего происходит при посещении саун, бассейнов, душевых спортзала.

   Заразиться можно после контакта с больным животным

2. Кератомикозы — узловатая трихоспория и отрубевидный лишай. Характеризуются поражением рогового слоя кожи на фоне отсутствия реакции воспалительного генеза. Узловатая трихоспория не встречается в наших регионах, чего не скажешь об отрубевидном лишае. Провоцирует заболевания дрожжеподобный грибок. Проявляется оно формированием небольших по размеру чешуек желтого цвета около волосяных фолликулов. С течением времени они сливаются, образуя пятна, покрытые чешуйками, их окраска может быть разной — от розового до бурого цвета.

   Отрубевидный (разноцветный) лишай

3. Кандидозы. Грибки рода Кандида в небольшом количестве считаются нормальной микрофлорой, однако в некоторых случаях (например, при снижении иммунной защиты организма) они начинают интенсивно размножаться, приводя к формированию кандидоза. Оно может поражать кишечник, кожу, полость рта и органы мочеполовой сферы.

   Кандидоз во рту

4. Глубокие микозы (аспергиллез, мукороз, пенициллиоз). Страдают от них чаще всего органы дыхания.
5. Псевдомикозы. Провоцируют их возникновение такие грамположительные микроорганизмы, как актиномицеты и нокардии. Диагностировать заболевание не всегда легко, для этого проводится оценка внешних признаков и лабораторных анализов.

Разновидности анализов на грибок

Для диагностирования грибковой инфекции врач прежде всего проводит осмотр пациента, собирает анамнестические данные и назначает лабораторные исследования. Это может быть:

1. Бактериологическое исследование. Оно позволяет определить тип грибка, который спровоцировал заболевание. Недостатком такого исследования считается продолжительность его проведения, она составляет 10 суток. Однако оно позволяет определить чувствительность грибка к медикаментозным средствам, а это значительно облегчает лечение и ускоряет процесс выздоровления.
2. Тест ПЦР. Позволяет определить структуру возбудителя на генетическом уровне. Используется чаще всего для определения уровня эффективности проводимой терапии.
3. Соскоб. Проводится с целью подтверждения того, что заболевание вызвано именно грибком. Как и предыдущее обследование может использоваться для проведения оценки эффективности проводимого лечения.

Каждое из перечисленных обследований отличается сроком проведения и информативностью. При первичном обращении обычно назначается посев на питательные среды. Это позволяет установить точный диагноз и назначить адекватную схему лечения.

Сразу нужно настроиться на то, что сдачу анализов нужно будет проводить несколько раз (для того чтобы установить диагноз и с целью определения эффективности проведенного лечения).

Стоимость в Инвитро

На территории России функционирует несколько современных лабораторий по определению грибковой инфекции. Среди них одно из самых первых мест по качеству обслуживания, достоверности, быстроте результатов занимает центр Инвитро. Записаться на прием можно на сайте, сидя за компьютером. Получить результаты в электронном виде. Приблизительные расценки услуг представлены в прайс-листе. Окончательная стоимость обсуждается индивидуально.

Стоимость обследования паразитарной инфекции:

• ногти ног, кожа, стопы – 805 руб.;
• микроскопия, посев на грибы ногтей, кожи – 1535 руб.;
• кандидоз слюны – 365 руб.;
• молочница ротовой полости – 365 руб.;
• посев на дрожжеподобные грибы с выявлением устойчивости к антибиотикам – 835 руб.

Грибковая инфекция опасна переходом в хроническую форму, осложнениями при отсутствии квалифицированного лечения. Неправильно подобранные препараты могут стать причиной прогрессирования кандидоза. По этой причине необходимо сделать соскоб, выявить вид патогенных микроорганизмов, определить устойчивость к тем или иным антибиотикам.

Интересное видео:

Микробиологические методы

С помощью микробиологических исследований удается установить, привела ли к формированию заболевания грибковая инфекция. Для обследования проводят забор биологического материала:

• частички ногтевой пластины;
• волос;
• соскоб с поверхности кожи.

Микроскопическое исследование

Показанием является подозрение на микоз кожи, волос или на онихомикоз ногтей. При грибковом поражении ногтей обследуется соскоб из разных участков ногтевой пластины. Его красят и обследуют под микроскопом. Зачастую в нем оказываются нити мицелия, грибковые споры и дрожжевые клетки.

Если поражена кожа, то проводится соскоб из зоны межевания здорового и пораженного участка, объясняется такая особенность тем, что именно в этой области локализуется наибольшее количество возбудителя.

Если патологический процесс локализуется на волосистой части головы, то материалом для обследования становятся волосы и чешуйки кожи. Продолжается исследование в среднем 3-5 дней. Оно позволяет узнать, что именно спровоцировало заболевание, редко определяется тип возбудителя и его количество.

Вариантом нормы является полное отсутствие грибков в обследуемом материале, незначительное их количество может указывать на носительство.

Культуральный метод

С помощью посева удается получить более точную информацию о возбудителе. Продолжительность проведения исследования может колебаться от 2 дней до месяца. Забор материала проводят аналогичным с предыдущим методом образом. После доставки в лабораторию биологический материал помещают на специальную питательную среду. При наличии грибов наблюдается рост колоний. Грибки из каждой колонии рассматривают микроскопически, определяя род и вид, а также их количество. В некоторых случаях может определяться даже чувствительность к медикаментозным средствам.

Исследование кожи, волос и ногтевых пластинок на поверхностные микозы

Микроскопическое исследование соскобов с гладкой кожи и ногтевых пластинок, а также волос с волосяной луковицей, используемое для диагностики поверхностных микозов кожи и ее придатков.

Синонимы русские

Микроскопия соскобов кожи, ногтевых пластинок и волос на грибы.

Синонимы английские

• Direct microscopy, Superficial mycoses
• KOH-test

Метод исследования

Микроскопия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Ногти, соскоб, волосы с волосяной луковицей.

Общая информация об исследовании

Поверхностные микозы кожи – это группа заболеваний кожи и ее придатков (ногтей и волос), возбудителями которых являются грибы, способные к поверхностной инвазии эпидермиса, волос и волосяных фолликулов и ногтевого аппарата. Чаще всего поверхностные микозы обусловлены наличием грибов рода Dermatophytes (в этом случае говорят о дерматофитии), однако причиной заболевания также могут быть грибы рода Candida, Malassezia, Trichosporon и Hortaea.

Клинический осмотр позволяет заподозрить наличие микоза гладкой кожи или микоза ногтей (онихомикоза), но не используется в качестве окончательного метода диагностики, так как многие другие заболевания могут иметь схожую клиническую картину (например, псориаз ногтей может напоминать онихомикоз). Основным методом диагностики этой группы заболеваний является прямая микроскопия, при которой исследуемый материал (чешуйки кожи, полученные при поскабливании в очаге поражения, или фрагменты пораженной ногтевой пластинки) исследуют под микроскопом после обработки раствором гидроксида калия (KOH). Микроскопия позволяет выявить гифы/псевдогифы и дрожжевые клетки гриба и охарактеризовать их морфологию, на основании чего может быть подтвержден диагноз «поверхностный микоз с уточнением его природы». Так, например, грибы-дерматофиты (Trichophyton, Microsporum и Epidermophyton) представлены множественными трубкообразными структурами с истинными септами и образованием спор. Грибы рода Candida, напротив, представлены вытянутыми дрожжевыми клетками (псевдогифы), а истинных спор не образуют. Грибы рода Malassezia образуют округлые дрожжевые клетки и вытянутые псевдогифы.

Возбудители поверхностных микозов в действительности часто входят в состав нормальной микробиоты кожи или временно ее колонизируют («здоровое носительство») и могут быть определены при микроскопии соскобов с нормальной кожи или соскобов с дистальной части ногтевых пластин у многих здоровых людей. По этой причине положительный результат исследования при отсутствии каких-либо клинических признаков микоза не имеет никакого клинического значения. Это утверждение, однако, не относится к анализу подногтевого содержимого проксимальных ногтевых пластин, которые в норме не содержат никаких микроорганизмов, в том числе и грибов.

Следует отметить, что микроскопия не позволяет уточнить вид гриба: для этих целей используют посев на питательную среду (микробиологический метод). Отрицательный результат исследования не позволяет полностью исключить поверхностный микоз.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики поверхностных микозов кожи (дерматофитии, кандидоза, разноцветного лишая и других) и онихомикоза.

Когда назначается исследование?

• При симптомах поверхностного микоза кожи (единичный или множественные очаги шелушения и гиперемии с четким краем, сопровождающиеся зудом);
• при наличии симптомов онихомикоза: изменения цвета (желтый, беловатый), толщины (подногтевой гиперкератоз) и формы ногтя (трещины, онихогрифоз).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат:

• дерматофития, кандидоз или другой поверхностный микоз;
• «здоровое носительство».

Отрицательный результат:

• норма.

Важные замечания

• Микроскопия не позволяет уточнить конкретный вид гриба.
• Грибы-дерматофиты сохраняются в чешуйках кожи в течение нескольких месяцев, грибы рода Candida – нескольких недель.
• Волосы для исследования должны быть с волосяной луковицей (не срезанные).

Также рекомендуется

• Посев Candida spp./дрожжеподобные грибы с подбором антимикотических препаратов

Кто назначает исследование?

Дерматовенеролог, миколог, врач общей практики.

Литература

• Burns T., Breathnach S., Cox N., Griffiths C. Rook’s Texbook of Dermatology / T. Burns, S. Breathnach , N. Cox, C. Griffiths; 8th ed. – Wiley-Blackwell, 2010.
• Wolff K., Johnson R.A. Fitzpatrick’s Color Atlas and Synopsis of Clinical Dermatology / K. Wolff, R.A. Johnson; 6th ed. – McGrawHill, 2009.

Иммуноферментный анализ

Предпочтение иммуноферментному методу диагностики отдается в том случае, если определить присутствие микоза трудно.

Обследование позволяет определить титр антител к грибку, чаще всего IgG к кандидозу и аспергиллезу. Исследование не требует особой подготовки, для него берут венозную кровь натощак или через 4 часа после еды. Результат можно получить через 1-5 дней, все будет зависеть от оборудования.

Результат может быть:

• положительный;
• отрицательный;
• сомнительный.

Некоторые лаборатории проводят количественное определение уровня иммуноглобулинов к грибковым инфекциям. В таких случаях обследование рекомендуется повторить через 14 дней.

Метод полимеразной цепной реакции

С помощью ПЦР-исследования удается определить присутствие грибка определенного вида. Положительными сторонами обследования считается его точность, достоверность и скорость. Недостаток — узкая направленность. Исследуемым материалом является соскоб с пораженного участка кожи или слизистой оболочки, могут обследоваться также моча, кровь, секрет простаты.

Обследование может быть качественным (результаты будут указывать на присутствие или отсутствие ДНК возбудителя) или количественным (определяется количество патологических клеток). Проводят исследование в течение 1-3 суток. Поставить диагноз кандидоз на основе ПЦР-анализа невозможно.

Показания к проведению анализа

Существует ряд показаний, при которых в обязательном порядке требуется проводить анализ соскоба с кожи пациента с подозрением на грибковую инфекцию. Взятие биологического материала необходимо в таких случаях:

• Появление признаков выпадения бровей и ресниц,
• Жалобы пациента на ухудшение общего состояния ногтей, их расслаивание,
• Образование на коже лица и тела большого количества высыпаний и глубоких фурункулов,
• Образование сыпи на слизистых оболочках.

Решение о необходимости проведения соскоба с кожи на грибок принимает дерматолог. Именно к нему на прием необходимо записываться при появлении перечисленных выше симптомов. Также делается анализ крови, который тоже дает немало информации о развитии у человека кожных патологий.

Правила подготовки к анализам

Для постановки верного диагноза и получения достоверных результатов проведенных исследований рекомендуется придерживаться следующих рекомендаций:

1. Избегать контактов пораженных грибковой инфекцией участков с водой на протяжении 72 часов.
2. Отказаться от приема противогрибковых препаратов за 3 суток до будущего анализа.
3. При поражении грибком ногтя запрещается проводить его обрезание в течение 10 суток.
4. Анализ на грибок ногтей на ногах или руках лучше сдавать до 12 часов дня натощак.
5. В течение суток перед запланированным обследованием необходимо избегать употребления спиртосодержащих напитков и заниматься чрезмерно тяжелым физическим трудом.
6. Накануне обследования необходимо свести к минимуму прием любых медикаментозных препаратов, если же это невозможно, о данном нюансе необходимо сообщить врачу.
7. За 3 часа до проведения исследования запрещается курить, а также пить чай и кофе.

При несоблюдении хотя бы некоторых из перечисленных рекомендаций результат обследования может быть недостоверным и малоинформативным. Это усложнит постановку диагноза и лечение.

Исследование мочи

Обнаружив изменения на ногтевых пластинах, следует выяснить их происхождение, в чем помогает анализ ногтя на грибок.

В диагностику входят несколько видов тестов:

• ПЦР-тест (полимеразная цепная реакция);
• клинический и биохимический тест венозной крови или урины.

Забор венозной крови проводится в манипуляционном кабинете. Лаборант надевает стерильные перчатки и использует вакуумную пробирку, на которую наклеивается информация о пациенте. Пробирки с собранной кровью отправляют в лабораторию для тщательного изучения и оценки показателей.

Важно! Не следует откладывать диагностические процедуры на длительное время, так как грибковая инфекция крайне заразна и отличается быстрой прогрессивностью. Она передается контактно-бытовым путем и обладает высоким индексом контагиозности.

Сдавая бактериологический анализ на определение грибка ногтей методом посева можно определить возбудителя онихомикоза. Лаборант собирает необходимый биоматериал и помещает его в питательную среду, в которой микробы начинают интенсивно размножаться. Рост патогенной флоры поддерживает термостат с комфортной для нее температурой. Колонии грибов вырастают в течение 3-14 суток.

Существуют негативные факторы, влияющие на достоверность обследования:

• вид собранного биоматериала. В крови грибки выявляются редко. В основном они локализуются в соскобе из пораженной пластины;
• применение фунгицидных пероральных лекарств накануне обследования. В таком случае анализ даст ложный результат.

Это самый достоверный анализ ногтя на грибок, позволяющий идентифицировать патогены, ставшие причиной развития онихомикоза:

• для теста подходит любой биоматериал;
• при помощи данной реакции можно определить ДНК возбудителя и выявить его тип;
• получить достоверные результаты уже через пять часов после сдачи анализа;
• возможность выявить даже единичные патогенные частицы.

Невзирая на массу преимуществ, метод ПЦР может давать ложные результаты. В основном это происходит при выявлении частиц уже разрушенного возбудителя.

Гемотест

Это оценка показателей крови на совместимость пищевых продуктов с организмом. Разрешенные продукты должны входить в меню человека, а от нежелательной пищи следует воздержаться или сократить ее употребление до минимума.

Тестирование проводится после приема антигрибковых медикаментов, когда с микозом удалось справиться полностью. Такая диагностическая процедура считается отличной профилактикой как грибковых, так и других заболеваний.

В моче здорового человека не должны содержаться грибковые инфекции. Их выявление означает, что произошел сбой в организме, и пациент требует системного лечения.

Лабораторным методом в моче могут выявить такие виды грибка:

• плесневые;
• дрожжевые;
• лучистые;
• кандида.

Для проведения анализов на грибок необходимо принести в лабораторию утреннюю мочу в стерильной емкости, предназначенной для этого.